Наличие сперматозоидов в сперме животных после разбавления

Научно теоретические основы сохранения спермы сельскохозяйственных животных включают в себя дальнейшую его заморозку и продолжительное хранение. Например, подготавливая сперму сельскохозяйственных животных к заморозке, необходимо предварительно знать как долго сперматозоиды могут жить и при каких условиях они погибают. Для этого были проведены исследования и разработаны различные среды поддерживающие наличие сперматозоидов и их жизнедеятельность продолжительное время.

Хранение спермы

Наличие сперматозоидов при хранении спермы имеет значение какую температуру они выдерживают. В результате, на полученном от производителей эякуляте были проведены исследования на продолжительность жизни при различной температуре. Оказалось, на основе проведенного анализа, семя живет относительно не долго. Подвижность сперматозоидов сохранялась:

• 12 часов при температуре 37 градусов
• 6 часов при температуре 40 градусов

Исследование производилось и на прекращение подвижности половых клеток. Быстрой гибели семени способствовало:

1. Перепад температур, температурный шок.
2. Быстрый расход энергетических веществ.
3. Отравление семени продуктами обмена (метаболитами).

В результате исследования половые клетки выдерживали и кратковременное хранение:

• при комнатной температуре +18⁰ +25⁰С
• +10 +14 градусов
• +5 градусов
• 0 +4 градусов — 3 — 7 суток

Анализ долговременного хранения спермы дал результаты при температуре:

• — 21⁰С (лед + соль)
• — 79⁰С (сухой лед)
• — 183⁰С (жидкий кислород)
• — 196⁰С (жидкий азот — хранение десятилетиями)

Чтобы погрузить семя в состояние анабиоза нужен определенный состав разбавителей и минусовые температуры.

Анабиоз бывает слабый при температуре 0⁰ — 4⁰С и глубокий при температуре — 196⁰С.

При быстром расходе энергетических веществ сперматозоиды могут погибнуть и эта потеря энергетического резерва вполне восполняется синтетическими средами.

Степень разбавления и состав разбавителей

При получении от производителей эякулята, в зависимости от его концентрации, сперму разбавляют.

В России принято чаще всего разбавление спермы быков 20 — 30 раз. В США семя разбавляют 100 раз.

Табл. Количество сперматозоидов в одной дозе по разным видам сельскохозяйственных животных

	Количество сперматозоидов в одной дозе	Объем дозы
Быки	10 — 25 млн.	5 -6 мл
Хряки	2 — 3 — 5 — 10 млрд.	80 — 150 мл
Овцы	75 — 100 млн.	0,1 — 2 мл
Жеребцы	1 — 2 млрд.	20 — 40 мл

Наличие сперматозоидов в разбавленной сперме

Для увеличения продолжительности жизни сперматозоидов, были разработаны научно теоретические основы разбавителей семени.

Разбавители для семени бывают разной степени сложности: простые, средние и сложные. Простые разбавители называются экстендоры, средние — протекторы и сложные — имплементоры.

Экстендоры

Простые разбавители содержат минимальное количество компонентов. Состав разбавителей: соли — цитрат натрия, фосфаты и сахара: глюкоза, фруктоза, лактоза, сахароза и другие.

Соли в чистом виде не используются, так как они электролиты и могут снимать заряд клеток и ускоряют активность.

Растворы сахаров тоже не используют в чистом виде.

Двухкомпонентные среды чаще всего применяются с целью увеличения объема (при фракционном осеменении свиней).

Протекторы

Протекторы — это среды защищающие семя от холодового удара, замерзания протоплазмы, её кристаллизации и препятствующие агглютинации (склеиванию) семени.

Состав разбавителей протектора: сахара и соли, яркий желток куриного яйца (лецитин), глицерин, антибиотики, хелатон.

Лецитин проникает внутрь клеток и обволакивает их, в сочетании с цитратом натрия обеспечивает определенное Ph.

Регулировка Ph достигается соотношением компонентов разбавителя.

Табл. Оптимальная степень разбавления желтка для семени

	Оптимальное содержание желтка в %
Бараны	10 — 20 %
Быки	10 — 20 %
Хряки	3 — 5 %
Жеребцы	1 % и менее

Глицерин подготавливает клетку к переохлаждению, желток предохраняет от холода. Без кристаллическое замерзание протоплазмы, витрификацию, определяет глицерин. Он также подавляет рост микробов. Оптимальная степень разбавления 3 — 7 %. Содержание глицерина свыше 7 % становится токсичным. Глицерин благоприятно влияет при температуре + 4⁰С, особенно активно он проникает во внутрь. Берет от клетки на себя часть свободной воды, обезвоживая клетку. При таком составе сперматозоид легче переносит переохлаждение.

Антибиотики добавляются по 75 — 100 тыс. ед. на 100 мл среды пенициллина или стрептоцида.

Хелатон добавляется для поддержания АТФ, его концентрация составляет 0,005 моля.

Имплементоры

Имплементоры — это среда наибольшей сложности, состав разбавителей оснащен физиологически активными веществами: ферментами, гормонами, нейротропными препаратами, витаминами в дополнение к составу протекторов.

Фермент муциназа (из секрета простаты кроликов) добавляется в виде порошка, 0,2 — 1 мг на 1 мл степень разбавления семени, с целью разжижения слизей (муцинов) в половом тракте самок.

Гормон окситоцин (из задней доли гипофиза) вводится для сокращения гладкой мускулатуры, 5 ед. на 100 мл разбавителя.

Нейротропные: карбохолин, прозерин — относятся к группе ядов. В минимальных концентрациях 0,1 % — карбохолин, 0,3 % прозерин, 1 мл на 100 мл степень разбавления семени. Они действуют возбуждающе на половой тракт.

Из группы витаминов применяют В₁ и В₁₂.

Разбавитель должен быть сделан строго по дозе на дистиллированной воде, определенного стандарта и соотношений компонентов. Частые разбавители: глюкозо-цитратно-желточные, гликакол (амино-уксусная кислота заменяет сахар)-цитратно-желточные, лактозо-цитратно-желточные, лактозо-глицерин-желточные, молочные разбавители с добавлением желтка и антибиотиков (для кратковременного хранения) — наиболее доступный и простой.

Молоко близко к биологическим жидкостям организма по Ph, по компонентам молока. Молоко кипятится и охлаждается до температуры тела животного + определенное количество желтка и определенное количество антибиотиков.

Если разбавитель приготовлен не правильно, то это выражается в агглютинации семени (склеивание головками).

Табл. При разном значении Ph наличие сперматозоидов со склеенными головками.

Ph	агглютинация
3	массовая
5	звёзчатая
6,8 — 7	норма

Соли в разбавителе создают определенную буферность. У быков и баранов буферными системами являются цитраты или фосфаты. У хряков — бикарбонатная, используется глюкозо-хелатон-цитратно-сульфатная среда.

Подписывайтесь на наши социальные сети: